分离突变体及克隆互补基因的新方法

申请公布号：

CN1192106C

申请号：

CN96196200.3

申请日期：

1996.06.24

申请公布日期：

2005.03.09

申请人：

丹尼斯科成分公司(丹尼斯科公司)

发明人：

伦德特·亨德里克·德格拉夫;亨丽埃特·凯瑟琳娜·范登布勒克;雅克·菲瑟

分类号：

C12N15/31;C12N15/80;C12N15/65;C12N15/63;C12N15/10;C12N1/15;C07K14/38;C12Q1/02;C12Q1/68;//(C12N1/15,C12R1∶645)

主分类号：

C12N15/31

代理机构：

永新专利商标代理有限公司

代理人：

林晓红

地址：

丹麦布拉布兰

摘要：

本发明属于微生物突变和突变体筛选的领域，具体地，本发明涉及以简单、直接和特异的方式获得代谢突变体。在一优选的实施方案中还可以获得不包括重组DNA的所需突变体，从而因缩短立法程序而加速将所述突变体参入供人类消费和应用的产品中。本发明的方法涉及随机突变和特异筛选所需的代谢突变体。本发明描述了一种核酸盒及其在筛选突变体的方法中的应用，所述的核酸盒包括编码一种双向标记的核酸序列，所述的核酸盒进一步包括与编码双向标记的核酸序列可操作地连接的一种基本转录单位，所述的核酸盒还包括以如此的方式与基本转录单位连接的一种可诱导增强序列或激活序列，所述的连接方式为在诱导增强序列或激活序列时能使编码双向标记的核酸序列表达，所述的可诱导增强序列或激活序列衍生自与一部分代谢的活性相关的基因。另外还描述了编码可诱导增强序列或激活序列的激活调节物的调节物基因xlnR，以及所述基因和/或其表达产物在过量表达同源或异源蛋白质或肽中的应用。本发明还涉及其中不存在所述基因或所述基因失活的剔除突变体，以及具有增加的或降低的DNA结合能力的突变体。

主权项：

1、一种核酸盒，包括a)编码一种双向标记的核酸序列，b)与编码双向标记的核酸序列可操作地连接的一种基本转录单位，c)以如此的方式与基本转录单位连接的一种可诱导增强序列或激活序列，所述的连接方式为在诱导增强序列或激活序列时能使编码双向标记的核酸序列表达，所述的可诱导增强序列或激活序列衍生自与一部分代谢的活性相关的基因。