一种基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器及其检测传染性病毒的方法

申请公布号：

CN101271111A

申请号：

CN200810031322.7

申请日期：

2008.05.16

申请公布日期：

2008.09.24

申请人：

湖南大学

发明人：

俞汝勤;蒋健晖;沈国励;楚霞;黄勇

分类号：

G01N33/569(2006.01);G01N33/535(2006.01);G01N27/327(2006.01)

主分类号：

G01N33/569(2006.01)

代理机构：

长沙正奇专利事务所有限责任公司

代理人：

马强

地址：

410082湖南省长沙市岳麓山

摘要：

本发明提供了一种基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器及其用于检测传染性病毒的方法，传感器包括微间隙阵列电极、硅烷化处理的电极基片、具有良好导电性的酶沉积物。本发明利用微间隙电极阵列免疫传感器，对人免疫缺乏病毒(HIV)抗体和乙肝病毒表面抗原(HBsAg)进行检测，提供了一种快速，高灵敏，高通量的传染病诊断方法，可望为传染病的早期诊断与现场筛查提供有效的技术手段。

主权项：

1.一种基于微间隙阵列电极的酶催化电导免疫传感器，其特征是，采用微间隙阵列金电极做基片，并采用以下步骤制得：(1)取常规光刻印刷法制作的微间隙阵列金电极做基片，它为叉指式双电极，正负电极均为两个梳形金电极，彼此交叉组成微间隙阵列金电极。梳形齿宽为1μm-100μm，间隙为1μm-100μm；(2)微间隙阵列金电极的硅烷化处理，过程是：a.将微间隙阵列金电极用无水乙醇清洗三次，每次1min；b.将所述电极浸入1M的NaOH溶液中28min-32min，再用超纯水清洗该电极三次，每次1min；吹干；c.将所述电极浸入含氨丙基三甲氧基硅烷5％(体积百分数)的乙醇溶液中，室温下静置23小时-25小时；这样可在微间隙阵列金电极间的基片上形成一氨基硅烷自组装单层；d.用超纯水清洗所述电极三次，吹干，即获得硅烷化的微间隙阵列金电极；(3)免疫传感器的制备，步骤是：a.将所述硅烷化的微间隙阵列金电极浸入质量分数为5％的戊二醛水溶液，室温下静置0.8小时-1.2小时；b.用超纯水清洗所述电极三次后，在该电极上滴加30μL传染性病毒的重组抗原(双抗原夹心法)或传染性病毒的特异抗体(双抗体夹心法)，室温下静置反应1小时；该传染性病毒的重组抗原或特异抗体溶液是将所述抗原或抗体溶于0.01M、pH7.4磷酸缓冲溶液而得，溶液中所述浓度为100μg/mL；c.用超纯水清洗所述电极三次，吹干，即得免疫传感器。